联系热线：4001088002
心肌缺血再灌注损伤 (MIRI) 小鼠/大鼠模型实验设计方案
物种与品系: 推荐首选 雄性 C57BL/6 小鼠 (遗传背景清晰，广泛用于心血管研究)。备选 雄性 SD 大鼠(心脏更大，操作相对容易，但成本高、耗材多)。年龄与体重:
小鼠:8-10 周龄(比原方案稍大，生理更稳定)，体重 22-28 g。大鼠:8-10 周龄，体重220-280g(原方案180-200g偏轻，此范围更常见且稳定)。来源与饲养: 使用 SPF(无特定病原体)级动物。适应性饲养 至少1周，标准光照周期(12h/12h)，自由饮水，标准饲料。实验前禁食 4-6小时(不禁水)，减少麻醉和手术风险。
伦理审批: 所有实验操作必须获得所在机构的 动物实验伦理委员会批准。
兴。
假手术组(Sham组):核心对照组。接受除LAD结扎外的所有手术操作(麻醉、开胸、心包切开、穿线但不结扎、关胸)。用于评估手术创伤本身的影响。(可选)药物干预组:在MIRI手术前/中/后给予待研究药物。需设置相应的 溶媒对照组(Vehicle组)(给予药物的溶剂，如生理盐水、DMSO等)。(可选)空白对照组(Naive组): 仅饲养，不接受任何手术或处理。用于评估基础状态。每组动物数量: 根据预实验结果和统计学要求(如效应量、显著性水平、检验效能)确定。一般每组小鼠不少于 8-10 只，大鼠不少于 6-8只，考虑手术死亡率 (通常10-20%)适当增加初始数量。
首选：异氟烷（诱导3-4% + 维持1.5-2.5%）+ 氧气（1-1.5 L/min）
备选：戊巴比妥钠（小鼠40-50 mg/kg ip；大鼠35-45 mg/kg ip）
必备：精细镊/剪、显微持针器、开胸器、6-0/7-0缝合线（LAD结扎）、4-0/5-0缝合线（关胸）、PE管（PE-10，1-2mm段，用于无损伤结扎）
辅助：蚊式钳、肋骨撑开器（大鼠推荐）
核心：小动物呼吸机（小鼠TV10ml/kg, RR110次/分；大鼠RR~70次/分）、ECG机、恒温加热垫+体温探头（维持37℃）、SpO2仪（监测血氧>95%）
抗感染：青霉素（小鼠5-10万U/kg；大鼠4-8万U/kg，sc/im ×3天）
镇痛：布托啡诺（0.5-1 mg/kg sc）或丁丙诺啡（0.05-0.1 mg/kg sc）
其他：肝素盐水（10U/ml）、碘伏/酒精、无菌生理盐水（37℃）、气管插管（小鼠18G套管）、眼膏
术前
异氟烷麻醉 → 颈部气管插管 → 连接呼吸机 → 备皮消毒 → 连接ECG/SpO2/体温监测。
开胸
左胸第3-5肋间钝性分离 → 撑开胸腔 → 剪开心包 → 暴露左心室及左心耳。
LAD结扎（核心）
定位：左心耳下缘1-2mm处（心大静脉深部）。
操作：
6-0缝线穿过LAD下方 → 套入PE管 → 打活结。
收紧活结（PE管压闭血管）→ 确认缺血（ECG ST↑>0.2mV + 心肌变白）。
剪短近心端线头，远心端留3-5cm于胸腔外。
缺血与再灌注
缺血：30分钟（严格计时，维持体温/麻醉）。
再灌注：轻拉预留线头松结 → 确认再通（心肌转红润 + ST回落）→ 计时（通常2-4小时）。
关胸
排出胸腔气体（暂停呼吸机+快速缝合）→ 缝合肌肉（5-0可吸收线）→ 缝合皮肤（4-0丝线）→ 停麻醉 → 拔管 → 术后即刻sc注射抗生素+镇痛药。
恢复期
预热笼盒（37℃）→ 持续监测至清醒（呼吸/体温/意识）→ 低流量供氧1-2小时（必要时）。
关键监测
呼吸（防气胸）、黏膜颜色（防休克）、体温（36.5-38℃）。
疼痛评估：弓背/蜷缩/拒食 → 追加镇痛药（布托啡诺6-12小时重复）。
24-48小时内：
常规处理
抗生素：青霉素sc ×3天（剂量同前）。
饮食：苏醒后立即给水（+5%葡萄糖），提供软食（湿润饲料）。
环境：单笼/安静/温暖，每日检查伤口与状态。
